1.       基本原則：

(1)  所有檢體都必須使用適當的無菌容器收集並配合無菌操作技術採檢。

(2)  收集真正病灶處之檢體，且不得受到鄰近區域微生物之污染。例如：自咽喉潰瘍處取檢體進行抹片染色檢查與培養時，須小心從真正潰瘍處採取檢體。

(3)  收集"足量”的檢體。例如：Pus、Body Fluid，最好能收集數毫升（mL）的檢體。

(4)  傷口或量少之檢體須使用適當的 Transtube送檢，絕不可以直接用一般無菌棉棒送檢。因為棉棒所能採集的檢體量有限，極易乾燥，且病原菌可能陷入棉棒中不易培養出來。

(5)  儘可能在未使用抗生素之前收集檢體。若已使用抗生素，應在檢驗單上註明使用抗生素。

(6)  檢體中不可添加任何防腐劑，以免干擾”有意義”病原菌的分離。

(7)  收集檢體時不可污染到容器外面，且蓋子要鎖緊。

(8)  檢體容器外需註明：姓名、病歷號、床號，檢驗單尚需註明檢體種類來源。

(9)  黴菌培養：不操作胃液檢體。

2.       微生物培養檢體種類及採檢方法/須知：

【血液培養（包含骨髓）】：

(1)  依序利用酒精，碘液，酒精消毒採檢部位、血液培養瓶口、採檢者手部；每道消毒步驟至少需等候約2分鐘，待自然風乾再進行下一個步驟，以完成消毒。

(2)  使用蝴蝶針將血液培養瓶正放採檢（須先採集至嗜氧瓶再使用厭氧瓶），可採集正確血量並減少血液培養瓶的培養基進入血管的風險。

(3)  血瓶打入血液後要適度搖動混合均勻；標籤不可貼在血瓶的條碼上。

(4)  使用過抗生素治療建議使用含樹脂血瓶，其他則使用無樹脂血瓶。

(5)  黴菌培養、結核菌培養則將5-10mL血液注入黴菌和結核菌專用之血液培養瓶。

(6)  採檢後，立即送至病理檢驗科，室溫保存。

【尿液培養檢體】：

(1)  此類檢體包含中段尿(Middle urine)、導尿(Catheterization urine)、PCN及穿刺尿(Puncture urine)等。

(2)  中段尿（最常採用）：

(a) 盡可能收集晨間第一次尿液降低偽陰性，並將前端先排掉，以無菌盒接取中段1~5mL；不建議採檢前大量飲用開水。

(b) 幼兒可用尿袋，但以收集一次小便為限，不可用儲尿。

(3)  留置導尿管尿液：

(a)  先75%酒精消毒導尿管口。

(b)  以空針抽取尿液1 ~5mL至無菌盒，迅速鎖緊蓋子。

(c)   不可用儲尿。

(4)  單導尿液：

(a)  導尿人員應戴上消毒手套，消毒男性病人的尿道口與龜頭或女性病人的尿道口與外陰部。

(b) 以潤滑膞液潤滑病人尿道及導管外部，將導管慢慢放入病人尿道中， 至尿液順利導出，直接以無菌盒留取尿液1 ~5mL，迅速鎖緊蓋子。

(5)  穿刺尿液：

(a) 檢集尿液前，膀胱須先脹尿。

(b) 於膀胱位置之皮膚進行除毛及消毒。

(c) 於恥骨上方，以空針穿刺膀胱，抽取尿液。

(d) 將抽取的尿液打入無菌盒，迅速鎖緊蓋子。

(6)  採檢後，立即送至病理檢驗科，若無法立刻送檢，應置於2~8℃保存（除N.gonorrhoeae須保存於室溫），但不超過6小時為限。

【痰液培養檢體】：

(1)  最好是收集清晨第一口痰。採檢前先用開水漱口或用牙膏牙刷清潔口腔及牙齒，再用無菌盒收集自呼吸道深部咳出來的痰。若無法自行咳痰，可由醫護人員以抽痰方式採檢。

(2)  收集時應儘量避免收集到口水、鼻腔或咽喉之分泌物。

(3)  收集量不可太少（1-5 ml）。

(4)  若無法立刻送檢，應置於2~8℃保存。

【支氣管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage、Bronchial brush）培養檢體】：

(1)  使用支氣管鏡採集檢體：

          (a) 非插管病人：經由鼻腔或口腔放入支氣管鏡。

          (b) 插管病人：經由氣管插管（Endotracheal tube）放入支氣管鏡。

(2)  將支氣管鏡小心放入氣管，緩慢分次注入無菌0.85%生理食鹽水，每次注入量成人為25~30mL，小孩為5~10 mL，每次注入位置應為同一部位，以沖洗肺泡，直到收集到足夠的液體以操作檢驗。每個支氣管肺泡沖洗液檢體採集的位置應包含遠端分泌物至細支氣管和肺泡。

(3)  在下次注入生理食鹽水前，溫和地抽吸檢體至黑頭無菌試管中。

(4)  第一次抽吸出的檢體可能會有污染，不可用於培養及染色檢驗。

(5)  採檢於同一部位的aliquots檢體可以結合後送驗微生物培養及抹片檢查；若由不同部位採檢的檢體(如：右上葉及右下葉)，不可交叉結合送驗，即同時送驗微生物培養及抹片檢查時，將右上葉檢體及右下葉檢體結合送驗。

(6)  採檢後，無法立刻送檢，置於2~8℃保存。

【鼻腔拭子】：

(1)  取出拭子，不得將拭子與拭子蓋分離。

(2)  將拭子插入鼻孔內側旋轉幾次，並用手指輕輕按壓鼻子外側，確保拭子和鼻子內部之間有良好的接觸。

(3)  將拭子放入傳送試管中，盡速送檢。

【喉嚨拭子】：

(1)  病人頭部後傾深呼吸，以壓舌棒壓住舌頭使得扁桃腺及後咽部清晰可見，以拭子來回擦拭懸壅垂及扁桃腺之間。

(2)  避免碰觸舌部及臉頰處以減少口腔正常菌叢污染。

【腦脊髓液培養檢體】：

(1)  病人需麻醉，以 75％酒精或2%碘酊消毒背部下方（消毒手續與血液培養檢體收集手續相同）由醫師以特製通針管由骼後上棘連線與後正中線的交會處為穿刺點（第3-4腰椎棘突間，有時也可在上一或下一腰椎間隙進行），全部過程須以最嚴格的無菌技術操作。

(2)  將抽出的CSF分別置於三根黑頭無菌試管，然後將第二管迅速送至病理檢驗科，若無法立即接種，則保存室溫保存，不可放置於冰箱。

    【糞便檢體】：

(1)  適用於Salmonella、Shigella、Vibrio species、Staphylococcus aurues：糞便排出後，以附在有蓋紅色液體容器上之塑膠棒挖取大約1gm的糞便（相當於一指節大小）且（或）含黏液、血液、或膿之糞便，直接裝入容器內送檢。如無法立刻送檢，應置於2-8℃保存。

(2)  直腸拭子檢體（Rectal swab）：適用於Campylobacter、VRE、泛抗藥菌株篩檢、黴菌培養、Clostridium difficile：採集時，以肥皂、水和70-75％酒精將肛門周圍洗淨，用傳送管拭子，插入肛門約5 cm處輕輕旋轉，以便使之與直腸黏膜表層接觸，取出後置於傳送管內立刻送檢。（藍頭傳送管─Campylobacter、VRE、泛抗藥菌株篩檢、黴菌培養，厭氧傳送管─Clostridium difficile）如無法立刻送檢，應置於2-8℃保存。

【膿、傷口、Discharge培養檢體】：

(1)  採檢前先用75％酒精或2% 碘液消毒周圍皮膚。若傷口很髒，可用不含抗生素的無菌生理食鹽水沖洗傷口再取檢體。

(2)  若是皮膚或黏膜下之膿瘍，儘可能以針筒抽取檢體，若無法抽取，則以無菌刀片切開，並利用無菌拭子壓擠，取其膿血送檢。

(3)  如果病灶處的分泌液量多，可以用針筒抽取的方式，將檢體抽出後再打入黑頭無菌試管或直接以無菌塑膠塞塞住針筒後送檢。如果只有少量或幾乎沒有分泌物時，則以拭子採檢。但若欲同時進行嗜氧菌和厭氧菌培養，應至少含有兩支拭子分別以嗜氧和厭氧傳送管傳送。

(4)  如無法立刻送檢，應置於室溫保存，不可放置於冰箱。

【體液培養檢體】：

(1)  包括胸水、腹水、關節液、心包膜積水、膽汁、總膽管及透析液等。

(2)  採檢前先以70-75％酒精或2%碘酊消毒皮膚後，以針筒抽取約3-5 mL，再置入黑頭無菌試管送檢，最好不要加任何抗凝劑，如無法立刻送檢，應置於室溫保存，不可放置於冰箱。

(3)  透析液：比照血液檢體消毒抗生素治療後之血液培養瓶的瓶口，再以針筒注入5-10 mL的透析液至已消毒的血瓶中。不能立刻送檢者，置於室溫保存，但不可超過24小時。

【胃腸道培養檢體】：

(1)  病人須禁飲食、禁藥、禁煙8小時以上。

(2)  將無菌的胃管經鼻或口插入胃內，約50~55公分深度即可到達胃大彎黏液池。

(3)  以50 mL針筒接於胃管外端抽吸胃液（或以負壓幫浦持續吸引） 。

(4)  抽取後，取下針筒，將液體注入無菌盒。

(5)  無法立刻送檢，應置於 2-8 ℃冰箱保存。

【生殖道培養檢體】

(1)  若懷疑有淋病陰道炎時

(a)  發育中或成年婦女由尿道口、 子宮頸或直腸取得檢體。

(b)  年幼女童由陰道外圍部位取得檢體。

(c)   男性病人如疑似急性淋病，由尿道取檢體；若疑似慢性淋病，採集前列腺或精囊之檢體。

(2)  羊水（Amniotic fluid）：經由羊膜穿刺、剖腹產或子宮內導管抽取3-5 mL置於無菌盒或黑頭無菌試管內。

(3)  生殖道檢體採檢後，無法立刻送檢，應置於室溫保存。

【導管培養檢體（只做嗜氧培養）】

(1)  包括人工血管（Port-A）、動脈導管（A line）、暫時性雙腔靜脈導管（Double Lumen Catheters）、周邊靜脈置入中央導管（PICC）、永久性雙腔導管（Permcath）、中心靜脈導管（CVC）等導管（Tip）

(2)  以無菌剪刀剪下前端5公分(不宜超過5公分)，置入黑頭無菌試管中送檢；Foley Tip不做培養。如無法立刻送檢，應置放於2-8℃保存。

【組織、活體組織、淋巴結培養檢體】：

(1)  將檢體置於黑頭無菌試管或無菌盒內（可加少量0.9 %食鹽水以保濕度），不可置入福馬林等固定液，因為微生物會被其殺死無法培養。

(2)  疑有污染的較大組織塊：可用燒紅的烙鐵燒灼其表面或置沸水中5~10秒鐘使表面變白消除污染後，再用無菌器械切開組織，取中央部位組織送檢。

(3)  如無法立刻送檢，應置於室溫保存，不可放置於冰箱。

【絨毛膜、胎盤及骨頭培養檢體】：

(1)  以傳送管拭子採檢；但若欲同時進行嗜氧菌和厭氧菌培養，應至少含有兩支傳送管，分別以藍頭傳送管及紅頭傳送管傳送。若無法立刻送檢，應置於室溫保存。

【眼睛培養檢體】：

(1)  由眼科醫師在bedside直接以傳送管拭子採取檢體，欲同時進行嗜氧菌和厭氧菌培養，應至少含有兩支傳送管，分別以藍頭傳送管（嗜氧）及紅頭傳送管（厭氧）傳送。若無法立刻送檢，應置於室溫保存。

【Legionella antigen（urine）】Legionella antigen（urine）：

(1)  檢體收集與尿液培養的採檢相同，此項目只做尿液檢體，其它不適合。

【Pneumococcus Antigen】：

        檢體收集與尿液培養及腦脊髓液的採檢相同。